دانلود مقاله با موضوع توسعه و اعتبار سنجی روش LC-MS/MS برای تعیین کمیت ATP، ADP و AMP
در قالب pdf و در 10 اسلاید،قابل ویرایش، شامل:
موضوع به انگلیسی:Development and validation of LC-MS/MS method for quantification of
ATP, ADP and AMP in dried blood spot, liver and brain of neonate
mice pups
بخشی از متن:هدف از این مطالعه توسعه و اعتبارسنجی روشی با استفاده از کروماتوگرافی مایع همراه با a
طیف سنج جرمی (LC-MS/MS) برای آنالیز همزمان آدنوزین تری فسفات (ATP)، آدنوزین دی فسفات
سطوح (ADP) و آدنوزین مونوفسفات (AMP) در لکه های خون خشک (DBS)، کبد، مغز (پاریتال و
نواحی پس سری) توله موش های نوزاد BALB/c، با استفاده از 13C10 ATP به عنوان استاندارد داخلی (IS). نوکلئوتیدهای همزمان
جداسازی نمونه های مورد بررسی در 5 دقیقه بر روی ستون C18 [Waters × Bridge C18،
(4.6 × 50 میلی متر، 3.5 میکرومتر)] با استفاده از شستشوی گرادیان 4 میلی مولار استات آمونیوم و 100٪ استونیتریل به عنوان متحرک
فاز A و فاز B متحرک به ترتیب. تشخیص MS در حالت یونیزاسیون مثبت ESI انجام شد. در
این روش بر اساس دستورالعمل های شورای بین المللی هماهنگی تایید شد. کالیبراسیون استاندارد
منحنی خطی در محدوده غلظت 0.1، 1، 5، 10، 15، 20 میکروگرم بر میلی لیتر مخلوط استاندارد با
مقدار شناخته شده استانداردهای داخلی (IS) و داده ها خطی خوبی را نشان دادند (R2 0.999)، با حد پایین تر
کمی سازی (LLOQ 0.1 میکروگرم در میلی لیتر). دقت درون اجرا و بین اجرای QCs (%CV) ≤ 15% و
دقت (٪) غلظت اندازه گیری شده QCs بین 88 و 110٪ بود. همه QCهای پردازش شده پایدار بودند
پس از اعمال شرایط مختلف نگهداری مطالعه استحکام واریانس قابل توجهی در آنالیت نشان نداد
کیفیت و کمیت اوج با تغییرات کوچکتر دما، pH و غلظت استونیتریل. در
فاکتور ماتریس در محدوده قابل قبولی قرار داشت. نتایج اعتبار سنجی حاضر نشان می دهد که روش LC-MS/MS توسعه یافته است
برای ارزیابی سطوح ATP، ADP و AMP در DBS، بافت کبد و مغز نوزادان موش مناسب است.
